CCK-8試劑盒是檢測(cè)細(xì)胞增殖、細(xì)胞毒性的試劑盒,為MTT法的替代方法,試劑盒中采用自己開(kāi)發(fā)的水溶性四唑鹽-WST-8,CCK-8試劑盒用于藥物篩選、細(xì)胞增殖測(cè)定、細(xì)胞毒性測(cè)定、腫瘤藥敏試驗(yàn)。
CCK-8試劑盒的性能特點(diǎn):
1.CellCountingKit-8簡(jiǎn)稱CCK-8試劑盒,是一種基于WST-8的廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測(cè)試劑盒。
2.CCK-8試劑中含有WST–8:化學(xué)名:2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽],它在電子載體的作用下被細(xì)胞線粒體中的一些脫氫酶還原生成橙黃色的formazan。細(xì)胞增殖越多越快,則顏色越深;細(xì)胞毒性越大,則顏色越淺。對(duì)于同樣的細(xì)胞,顏色的深淺和細(xì)胞數(shù)目呈線性關(guān)系。
3.WST-8是MTT的一種升級(jí)替代產(chǎn)品,和MTT或其它MTT類似產(chǎn)品如XTT、MTS等相比有明顯的優(yōu)點(diǎn)。首先,MTT被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成的formazan不是水溶性的,需要有特定的溶解液來(lái)溶解;而WST-8和XTT、MTS產(chǎn)生的formazan都是水溶性的,可以省去后續(xù)的溶解步驟。其次,WST-8產(chǎn)生的formazan比XTT和MTS產(chǎn)生的formazan更易溶解。再次,WST-8比XTT和MTS更加穩(wěn)定,使實(shí)驗(yàn)結(jié)果更加穩(wěn)定。另外,WST-8和MTT、XTT等相比線性范圍更寬,靈敏度更高。
4.WST-8和WST-1相比,檢測(cè)靈敏度更高,更易溶解,并且更加穩(wěn)定。
5.本試劑盒可以用于細(xì)胞因子等誘導(dǎo)的細(xì)胞增殖檢測(cè),也可以用于抗癌藥物等對(duì)細(xì)胞有毒試劑誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性檢測(cè),或一些藥物誘導(dǎo)的細(xì)胞生長(zhǎng)抑制檢測(cè)。
6.本試劑盒檢測(cè)非常便捷。試劑盒僅一管已經(jīng)配制好的含有WST-8的CCK-8溶液,無(wú)須再進(jìn)行任何配制等操作。無(wú)須使用同位素,所有的檢測(cè)步驟僅在同一塊96孔板內(nèi)完成。不必洗滌細(xì)胞,不必收集細(xì)胞,也不必采用額外的步驟去溶解formazan??梢杂糜诖笈繕悠返臋z測(cè)。
7.酚紅和血清對(duì)本試劑盒的測(cè)定無(wú)明顯影響。
8.WST-8對(duì)細(xì)胞無(wú)明顯毒性。加入WST-8顯色后,可以在不同時(shí)間反復(fù)用酶標(biāo)儀讀板,使檢測(cè)時(shí)間更加靈活,便于找到*測(cè)定時(shí)間。
9.關(guān)于不同細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性檢測(cè)試劑盒的比較和選擇。
10.本試劑盒可以測(cè)定100個(gè)樣品。