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細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備與液體的滅菌
所有培養(yǎng)過程中接觸到的設(shè)備和試劑都要進(jìn)行滅菌,滅菌方法的選擇主要取決于物品在高溫下的穩(wěn)定性,通常情況下,如果物品可抗高溫,如金屬,玻璃,耐熱的塑料(如PTFE),就可采用干熱滅菌法,這是簡單有效的方法之一,這種方法可以使放置的物品的所有部位在滅菌過程中都達(dá)到所需的溫度.溫?zé)釡缇彩且环N的方法,可應(yīng)用于熱穩(wěn)定的液體,如水,鹽溶液或一些特殊配方的培養(yǎng)基.放射線可用于消毒不耐熱的物品,如塑料.由于需要相當(dāng)高的劑量(25kGy),一般要在中心設(shè)備中進(jìn)行,它也能提供電子波滅菌.乙希烯氧化物也可用于不耐熱塑料的滅菌,但這種方法會導(dǎo)致乙希烯氧化物吸附在塑料表面,需要幾天才能揮發(fā)釋放.還可使用其他化學(xué)滅菌劑,包括次氯酸那鈉和氯防仿,但它們更多是作為消除污染的試劑而用于液體和塑料物品的滅菌.氯防仿還可用于熏蒸.
不耐熱的液體可采用微孔過濾法滅菌.有正壓過濾法:如將濾器與相應(yīng)大小的注射器的出口相連,有總直徑大于293mm的內(nèi)嵌盤狀濾器,也有內(nèi)部有許多皺折,面積大于1000cm2的筒狀濾器;還有負(fù)壓過濾法;將一個真空瓶與濾器相連/負(fù)壓過濾雖然需要一個真空管或真空泵,但卻是一種簡單有效的過濾方法,因為過濾后的液體可直接收集至瓶中儲存起來.不過負(fù)壓過濾會導(dǎo)致pH升高,因為溶解在培養(yǎng)基中的CO2會丟失.
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